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影响蛋白质盐析的3个因素

(1)温度





：除对温度敏感的蛋白质在低温(4度)操作外，一般可在室温中进行

。一般温度低蛋白质溶介度降低。但有的蛋白质(如血红蛋白
、肌红蛋白

、清蛋白)在较高的温度(25度)比0度时溶解度低
，更容易盐析。

(2)pH值：大多数蛋白质在等电点时在浓盐溶液中的溶介度最低。

(3)蛋白质浓度



：蛋白质浓度高时，欲分离的蛋白质常常夹杂着其他蛋白质地一起沉淀出来(共沉现象)

。因此在盐析前血清要加等量生理盐水稀释
，使蛋白质含量在2.5-3.0%
。

蛋白质盐析常用的中性盐，主要有硫酸铵


、硫酸镁、硫酸钠
、氯化钠
、磷酸钠等。 其中应用最多的硫酸铵
，它的优点是温度系数小而溶解度大(25度时饱和溶液为4.1M
，即767克/升


；0度时饱和溶解度为3.9M，即676克/升)




，在这一溶解度范围内
，许多蛋白质和酶都可以盐析出来
；另外硫酸铵分段盐析效果也比其他盐好，不易引起蛋白质变性。硫酸铵溶液的pH常在4.5-5.5之间
，当用其他pH值进行盐析时，需用硫酸或氨水调节。