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    PeproTech细胞因子厂家直销
    编辑 :       时间: 2012-11-13       https:// www.freedomyiqi.com

    PeproTech细胞因子厂家直销

    细胞因子溶解方法
         
    PeproTech细胞因子中不含载体蛋白(Carrier Protein)或其他添加剂(如BSA 、HAS或蔗糖等),并且通常以最少量的盐来进行冻干处理 ,因此微量的细胞因子在冻干过程中会沉积于管内 ,形成很薄或不可见的蛋白层 。所以EBET易博建议在收到产品后 ,务必在开盖前先离心,使粘在管盖或管壁上的蛋白聚集于管底(此时能否见到白色沉淀均属正常现象) 。

    1.离心 :高速离心 (10, 000 rpm) 20-30 秒,或低速离心 (2, 000 rpm) 5 分钟。

    2.溶解(Reconstitution):用去离子水或其它缓冲液(根据说明书要求进行选择)溶解至说明书要求的浓度 (一般为 0.1-1.0 mg/mL,如10ug的产品,需用10uL-100uL的去离子水或缓冲液溶解) 。溶解时不可振荡,避免因化学键的断裂造成蛋白失活,可加入适当的溶剂轻摇并静置一段时间,待细胞因子完全溶解后使用。
    溶剂的选择 :
    1)要求用去离子水溶解的产品,务必不可用盐溶液,避免过高的盐浓度造成蛋白不可逆的析出;
         
    2) 要求用盐溶液溶解的产品 ,请依照说明书上的浓度 ,同样也是为了避免过高的盐浓度 。

    3.分装和贮存(Aliquot and Storage):蛋白溶解后可根据自己的实验需要进一步稀释成工作液,稀释可用RPMI 1640 、DMEM或PBS等溶液,其中最好含有5-10%的FCS (小牛或胎牛血清)或0.5 %的BSA(牛血清白蛋白)来稳定蛋白。工作液在4℃可保存1周 ,如需长期保存 ,则需分装冻存于-20℃ (注意 :不可冻存于-80℃)。分装时每管中工作液的体积最好是一次实验的用量 ,以实现每次实验用完一只工作液,避免反复冻融引起蛋白活性的降低 。

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