peprotech细胞因子中不含载体蛋白(CarrierProtein)或其他添加剂(如A、HAS或蔗糖等)



，并且通常以最少量的盐来进行冻干处理

，因此微量的peprotech细胞因子在冻干过程中会沉积于管内


，形成很薄或不可见的蛋白层

。所以EBET易博建议在收到产品后
，务必在开盖前先离心
，使粘在管盖或管壁上的蛋白聚集于管底(此时能否见到白色沉淀均属正常现象)。

1．离心
：高速离心(10,000rpm)20-30秒，或低速离心(2,000rpm)5分钟






。

2．溶解(Recotitution)：用去离子水或其它缓冲液(根据说明书要求进行选择)溶解至说明书要求的浓度(一般为0.1-1.0mg/mL




，如10ug的产品，需用10uL-100uL的去离子水或缓冲液溶解)。溶解时不可振荡，避免因化学键的断裂造成蛋白失活
，可加入适当的溶剂轻摇并静置一段时间，待细胞因子完全溶解后使用
。溶剂的选择

：

1)要求用去离子水溶解的产品，务必不可用盐溶液
，避免过高的盐浓度造成蛋白不可逆的析出





；

2)要求用盐溶液溶解的产品
，请依照说明书上的浓度，同样也是为了避免过高的盐浓度。

3．分装和贮存(AliquotandStorage)


：蛋白溶解后可根据自己的实验需要进一步稀释成工作液
，稀释可用RPMI1640、DMEM或等溶液

，其中最好含有5-10%的FCS(小牛或胎牛血清)或0.5%的A(牛血清白蛋白)来稳定蛋白







。工作液在4℃可保存1周，如需长期保存

，则需分装冻存于-20℃(注意
：不可冻存于-80℃)
。分装时每管中工作液的体积最好是一次实验的用量，以实现每次实验用完一只工作液，避免反复冻融引起蛋白活性的降低peprotech细胞因子中不含载体蛋白(CarrierProtein)或其他添加剂(如A
、HAS或蔗糖等)
，并且通常以最少量的盐来进行冻干处理，因此微量的细胞因子在冻干过程中会沉积于管内，形成很薄或不可见的蛋白层
。