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peprotech细胞因子常用的标本类型
编辑         :       时间  : 2012-10-31       https:// www.freedomyiqi.com

peprotech细胞因子常用的标本类型

全血 :使用肝素钠抗凝的真空采血管采血,不易采用肝素锂、EDTA和ACD抗凝剂 ,血样在8小时内分析 ,超过8小时会导致活性的损失   ,一般细胞因子阳性细胞会减少5% 。如不能在8小时之内检测  ,应将真空采血管水平室温放置。

自身血浆中外周血单个核细胞(PBMCs) :使用肝素钠抗凝的采血后 ,分离PBMCs,24小时内分析 。

组织培养基中的外周血单个核细胞(PBMCs) :用Ficoll分离PBMCs ,将细胞重悬于含10%热灭活胎牛血清(FBS)的RPMI-1640培养基中,调节细胞浓度为2×106细胞/ml  。

调节细胞浓度2×106细胞/mL于新鲜培养基中。

冰冻全血与PBMCs   :使用1×红细胞裂解液处理活化的外周血或者PBMCs,用PBS漂洗,并用含1%的BSA及10%的DMSO的PBS重悬 ,-70℃冻存     。溶化后细胞置于染色管中,加上2~3mL的洗液,离心5分钟后 ,用破膜剂对细胞进行破膜和染色。

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